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高效液相色譜儀是由儲(chǔ)液器、泵、進(jìn)樣器、色譜柱、檢測器、記錄儀等幾部分組成。儲(chǔ)液器中的流動(dòng)相被高壓泵打入系統(tǒng)，樣品溶液經(jīng)進(jìn)樣器進(jìn)入流動(dòng)相，被流動(dòng)相載入色譜柱(固定相) 內(nèi)，由于樣品溶液中的各組分在兩相中具有不同的分配系數(shù)，在兩相中做相對(duì)運(yùn)動(dòng)時(shí)，經(jīng)過反復(fù)多次的吸附- 解吸的分配過程，各組分在移動(dòng)速度上產(chǎn)生較大的差別，被分離成單個(gè)組分依次從柱內(nèi)流出，通過檢測器時(shí)，樣品濃度被轉(zhuǎn)換成電信號(hào)傳送到記錄儀，數(shù)據(jù)以圖譜形式打印出來。高效液相色譜儀作為一種常用的分析方法一樣，不可能十全十美，作為使用者在掌握了高效液相色譜儀的特點(diǎn)，使用范圍和局限性的前提下，充分利用高效液相色譜儀的特點(diǎn)，就可在解決實(shí)際分析任務(wù)中發(fā)揮重要的作用。??

一、高效液相色譜儀的應(yīng)用范圍

高效液相色譜儀適于分析高沸點(diǎn)不易揮發(fā)的、受熱不穩(wěn)定易分解的、分子量大、不同極性的有機(jī)化合物;生物活性物質(zhì)和多種天然產(chǎn)物;合成的和天然的高分子化合物等。它們涉及石油化工產(chǎn)品、食品、合成藥物、生物化工產(chǎn)品及環(huán)境污染物等，約占全部有機(jī)化合物的 80%。其余 20%的有機(jī)化合物，包括永久性氣體，易揮發(fā)低沸點(diǎn)及中等分子量的化合物，只能用用氣相色譜儀進(jìn)行分析。

高效液相色譜儀

二、高效液相色譜儀方法的局限性

高效液相色譜儀雖具有應(yīng)用范圍廣的優(yōu)點(diǎn)，但也有下述局限性。

第一、高效液相色譜儀也不能代替中、低壓柱色譜法，在?200kPa 至 1MPa 柱壓下去分析受壓易分解、變性的具有生物活性的生化樣品。

第二，在高效液相色譜儀中，使用多種溶劑作為流動(dòng)相，當(dāng)進(jìn)行分析時(shí)所需成本高于氣相色譜儀。且易引起環(huán)境污染、當(dāng)進(jìn)行梯度洗脫操作時(shí)，它比氣相色譜儀的程序升溫操作復(fù)雜。

第三、高效液相色譜儀不能替代氣相色譜儀，去完成要求柱效高達(dá)?10 萬塊理論塔板數(shù)以上，必需用毛細(xì)管氣相色譜儀分析組成復(fù)雜的具有多種沸程的石油產(chǎn)品。

第四、高效液相色譜儀中缺少如氣相色譜儀中使用的通用型檢測器(如熱導(dǎo)檢測器和氫火焰離子化檢測器)。近年來蒸發(fā)激光散射檢測器的應(yīng)用日益增多，有望發(fā)展成為高效液相色譜儀的一種通用型檢測器。??